ČSN ISO 15213   (560652) Mikrobiologie potravin a krmiv - Horizontální metoda stanovení počtu bakterií redukujících sulfity za anaerobních podmínek růstu

Anotace textu normy ČSN ISO 15213   (560652)

Tato česká norma specifikuje horizontální metodu stanovení počtu bakterií redukujících sulfity za anaerobních podmínek růstu. Platí pro výrobky určené pro lidskou výživu a ke krmení zvířat a vzorky z prostředí potravinářských výroben a prodejen. Ke stanovení jejich počtu se používá technika počítání kolonií a jako selektivně diagnostická půda agar se železem a siřičitanem. Tímto agarem se inokulum v Petriho miskách zalévá, druhá možnost je použití zkumavek s tímto agarem, kam se inokulum přenese a s půdou se smísí. V obou případech se po inokulaci nalévá ještě horní vrstva téhož agaru. Takto naočkované plotny se inkubují v anaerostatu při 37 °C ± 1 °C po dobu 24 h až 48 h (konečné hodnocení se provádí po 48 h) nebo při 50 °C ± 1 °C, pokud je podezření na přítomnost termofilních bakterií redukujících sulfity. V případě zkumavek není inkubace v anaerostatu nutná. Tyto bakterie produkují enzym sulfitreduktázu. Proto redukují v selektivně diagnostické půdě přítomné siřičitany (sulfity) charakterizované aniontem (SO3)2- na sulfidy charakterizované aniontem (S)2-. Ten pak reaguje se železem přítomným v půdě za vzniku černého sulfidu železnatého (FeS). Jako kolonie bakterií redukujících sulfity za anaerobních podmínek růstu se počítají typické černě zbarvené kolonie. Příslušnost izolátů k rodu Clostridium se potvrdí konfirmačními testy. Je možné použít záhřev výchozí suspenze k eliminaci vegetativních forem. To se používá v případě termofilních bakterií redukujících sulfity za anaerobních podmínek růstu a výsledky se pak interpretují jako počet jejich spór.